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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
含糖子本身的非常多元性和海量N-glycoproteins低表达出来级别使用对N-glycosylation构成的定量分析的描写十分困难的。在验测低丰度的N糖基化呈现核淀粉酶或肽段时,在这当中掺入海量未呈现的核淀粉酶肽断,这很更易将低丰度的糖基化呈现核淀粉酶肽段的电磁波遮掩。凝素亲和法是现有糖核淀粉酶质组学中应用软件最广泛泛的拆分含有方案。凝集素(lectin)是类糖融合核淀粉酶质,能专业快速精确某种特出构成的单糖或聚糖中指定的糖基队列而与之融合,她们与糖链不可逆转非共价融合,糖核淀粉酶或糖肽被凝集素捕捉到在这之后,常常用指定的单糖经过角逐融合凝集素将糖核淀粉酶或糖肽冲洗掉之后。 胆固醇质做好酶解后再生借助凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,再用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切掉衔接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该整理原因研究Asn碳原子量不断增加2.9890Da。末尾用高导致精度LC-MS质谱仪探测脱糖后的肽段,经过搜素信息库,询问脱糖后碳原子量和它的理论上碳原子量的的变化已经糖基化掩盖肽段的编码序列,才能确认该胆固醇质的N-糖基化位点。N-糖基化位点确认后续,再再生借助label-free的的工作原理对其做好参考值研究。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
对应物品
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